抑菌凝膠檢測的方法有哪些(詳細(xì)介紹大全)

抑菌凝膠的檢測方法多種多樣，常見的檢測方法有OD值計數(shù)法、涂布平板法、抑菌環(huán)法、掃描電鏡法（SEM）、載體浸泡定量抑菌試驗、抑菌環(huán)試驗等，下面由企檢網(wǎng)小編帶您了解抑菌凝膠檢測的相關(guān)內(nèi)容，幫助您做出明智的選擇。

1、OD值計數(shù)法
步驟：
將一定菌液濃度（約10^6 CFU/ml）的細(xì)菌懸液與抗菌凝膠孵育12小時（時間可根據(jù)試驗設(shè)計調(diào)整）。
孵育結(jié)束后，將細(xì)菌懸液稀釋適當(dāng)比例，便于后期計數(shù)。
采用OD值計數(shù)法計算抑菌率。
原理：OD值計數(shù)法免去涂板操作，可直接對抗菌凝膠作用后的細(xì)菌懸液進(jìn)行OD600吸光度值的測定。OD值越低，抗菌作用越強(qiáng)。
2、涂布平板法
步驟：
將一定菌液濃度（約10^6 CFU/ml）的細(xì)菌懸液與抗菌凝膠孵育12小時（時間可根據(jù)試驗設(shè)計調(diào)整）。
孵育結(jié)束后，將細(xì)菌懸液稀釋適當(dāng)比例，便于后期計數(shù)。
接種至固體營養(yǎng)培養(yǎng)基表面，37℃培養(yǎng)12-24小時后，取出培養(yǎng)皿拍照計數(shù)。
可分別采用平板計數(shù)法和活死/染色法，計算抑菌率。
原理：平板計數(shù)法可通過明場拍照，利用ImageJ軟件計算得到抑菌率。活死/染色法可利用活死細(xì)菌雙染試劑盒分別將活細(xì)菌和死細(xì)菌染上綠色和紅色后，進(jìn)行細(xì)菌活死的鏡檢觀察，該方法更為直觀。
3、抑菌環(huán)法
步驟：
將一定體積大小的圓柱形水凝膠樣品或浸潤抗菌凝膠溶液的紙片放入均勻涂有細(xì)菌懸液的固體營養(yǎng)培養(yǎng)基上。
37℃培養(yǎng)12-24小時后，測量抑菌環(huán)大小。
原理：水凝膠的抗菌性能由抑菌環(huán)的直徑來決定，直徑越大則抗菌性能越好，反之則抗菌性能越差。
4、掃描電鏡法（SEM）
步驟：
將水凝膠作用后的細(xì)菌經(jīng)2.5%戊二醛溶液于4℃條件下固定40分鐘。
依次使用濃度為20-100%的乙醇水溶液進(jìn)行梯度脫水后，干燥后進(jìn)行SEM觀察。
原理：通過SEM圖可直觀看出：空白試樣組處理過的細(xì)菌細(xì)胞膜是完整光滑的，而抗菌水凝膠處理后的細(xì)菌細(xì)胞膜一般會發(fā)生皺縮，發(fā)生形變甚至破裂。
5、載體浸泡定量抑菌試驗
步驟：
取無菌平皿，用無菌鑷子取2片試驗樣片，勿重疊，置20℃ ±1℃水浴5分鐘。
在每一樣片上滴加0.1 mL試驗用菌懸液，立即計時。
待試驗菌與樣片接觸作用至說明書的規(guī)定時間，分別夾取染菌樣片加于5.0 mL PBS試管中，混勻。
振蕩洗脫，分別吸取1.0 mL樣液，按活菌培養(yǎng)計數(shù)方法測定存活菌數(shù)，每管樣液接種2個平皿。
如平板上生長的菌落數(shù)較多時，可10倍系列稀釋后，再進(jìn)行活菌培養(yǎng)計數(shù)。
同時用與試驗樣品同質(zhì)材料不含抑菌成分的對照樣片2片代替試驗樣片進(jìn)行試驗，作為陽性對照。
陽性對照回收菌量為1.0×10^4 CFU/片～9.0×10^4 CFU/片；取同批次PBS、培養(yǎng)基作陰性對照。
所有試驗樣本和對照樣本均在36℃±1℃培養(yǎng)，細(xì)菌繁殖體培養(yǎng)48小時、白色念珠菌培養(yǎng)72小時觀察最終結(jié)果。
試驗重復(fù)3次，計算抑菌率。
結(jié)果判定：抑菌率≥50%～90%，判有抑菌作用；抑菌率≥90%，判有較強(qiáng)抑菌作用。
6、抑菌環(huán)試驗
步驟：
適用于含溶出性抑菌物質(zhì)，可制成直徑為5 mm片狀物的固體抑菌產(chǎn)品的抑菌效果鑒定。
也可用于鑒別抗抑菌樣品中是否含有可溶性抑菌物質(zhì)。
結(jié)果判定：陰性對照應(yīng)無菌生長，陽性對照菌數(shù)比0接觸時間的菌數(shù)明顯增加。各次試驗的殺菌率均≥90%，即可認(rèn)定該樣品具有抗菌作用；殺菌率≥99%，判有較強(qiáng)抗菌作用。
7、振蕩燒瓶試驗
步驟：
適用于添加有非溶出性抗菌物質(zhì)的抗菌產(chǎn)品對微生物抗菌效果的鑒定。
在進(jìn)行振蕩燒瓶試驗前，需要鑒定其抗菌成分是否可溶出，如果有溶出性抗菌材料，參照可溶出抗菌材料檢測，無溶出性抗菌材料，可選用振蕩燒瓶法進(jìn)行。
結(jié)果判定：不加樣片組的菌落數(shù)在1.0×10^4 CFU/mL～9.0×10^4 CFU/mL，且樣品振蕩前后平均菌落數(shù)差值在10%以內(nèi)，試驗有效；被試樣片組抑菌率與對照樣片組抑菌率的差值≥26%，判產(chǎn)品具有抗菌作用。
8、貼膜試驗
步驟：
適用于PE抗菌底模、PE打孔膜及PE抗菌包裝袋、抗菌塑料、抗菌地板、抗菌瓷磚等產(chǎn)品抗菌效果測定。
通過將細(xì)菌污染于樣品表面，然后用塑料薄膜覆蓋，使細(xì)菌與樣品表面充分接觸，以測定其抗菌效果。
結(jié)果判定：根據(jù)具體標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。