非洲豬瘟檢測(cè)方法及原理是什么

非洲豬瘟主要檢測(cè)方法有臨床癥狀觀察、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、核酸檢測(cè)、抗原檢測(cè)、抗體檢測(cè)等，下面由企檢網(wǎng)小編帶您了解非洲豬瘟檢測(cè)的相關(guān)內(nèi)容，幫助您做出明智的選擇。

一、檢測(cè)方法
臨床癥狀觀察：觀察家豬或野豬是否出現(xiàn)高熱、皮膚發(fā)紺、出血、食欲減退、精神萎靡等癥狀。
病理剖檢：對(duì)疑似感染非洲豬瘟的家豬或野豬進(jìn)行病理剖檢，觀察其內(nèi)部器官的病變情況，如淋巴結(jié)、spleen、腎臟等是否存在出血、腫大等特征。
實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：
核酸檢測(cè)：
紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)（HAD）：非洲豬瘟病毒具有紅細(xì)胞吸附特性，通過(guò)觀察病毒與紅細(xì)胞的結(jié)合情況來(lái)判斷病毒的存在。
熒光抗體試驗(yàn)（FAT）：利用熒光標(biāo)記的抗體與病毒抗原結(jié)合，在熒光顯微鏡下觀察病毒的存在。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）：通過(guò)特異性引物對(duì)非洲豬瘟病毒的核酸進(jìn)行擴(kuò)增，從而檢測(cè)病毒的存在。
Taqman探針熒光PCR試驗(yàn)：在PCR反應(yīng)中加入Taqman探針，通過(guò)熒光信號(hào)的變化來(lái)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)核酸擴(kuò)增過(guò)程。
重組酶介導(dǎo)的等溫核酸擴(kuò)增技術(shù)（RAA）：在恒溫條件下，利用重組酶、單鏈結(jié)合蛋白、鏈置換DNA聚合酶等進(jìn)行核酸擴(kuò)增。
環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)（LAMP）：在恒溫條件下，利用特異性引物和鏈置換DNA聚合酶，對(duì)非洲豬瘟病毒的核酸進(jìn)行擴(kuò)增。
抗原檢測(cè)：
間接ELISA抗體試驗(yàn)：利用酶標(biāo)抗體與待檢樣本中的病毒抗原結(jié)合，再加入底物顯色，通過(guò)OD值判斷病毒抗原的存在。
阻斷ELISA抗體試驗(yàn)：基于競(jìng)爭(zhēng)原理，待檢樣本中的抗體與酶標(biāo)記抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合固相抗原，通過(guò)顯色反應(yīng)判斷抗體的存在。
免疫過(guò)氧化物酶試驗(yàn)（IPT）：利用酶標(biāo)記抗體與病毒抗原結(jié)合，再加入過(guò)氧化物酶底物顯色，通過(guò)鏡檢觀察病毒的存在。
間接熒光抗體試驗(yàn)（IFAT）：利用熒光標(biāo)記的抗體與病毒抗原結(jié)合，在熒光顯微鏡下觀察病毒的存在。
抗體檢測(cè)：
間接ELISA：檢測(cè)血清中針對(duì)非洲豬瘟病毒的特異性抗體。
阻斷ELISA：檢測(cè)血清中針對(duì)非洲豬瘟病毒的特異性抗體。
雙抗原夾心ELISA：檢測(cè)血清中針對(duì)非洲豬瘟病毒的總抗體。
化學(xué)發(fā)光免疫分析：在酶標(biāo)板上包被非洲豬瘟病毒抗原，加入待檢血清和辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體，通過(guò)化學(xué)發(fā)光值判斷病毒抗體的存在。
二、檢測(cè)原理
核酸檢測(cè)的原理：通過(guò)特異性引物對(duì)非洲豬瘟病毒的核酸進(jìn)行擴(kuò)增，從而檢測(cè)病毒的存在。其中，PCR檢測(cè)是基于核酸擴(kuò)增的原理，利用特異性引物和耐高溫的DNA聚合酶，在體外對(duì)非洲豬瘟病毒的DNA進(jìn)行擴(kuò)增，從而使其濃度達(dá)到可檢測(cè)的水平。
抗原檢測(cè)的原理：利用抗原與抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)，檢測(cè)樣本中是否含有非洲豬瘟病毒的抗原。
抗體檢測(cè)的原理：通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等方法，檢測(cè)血清中是否含有針對(duì)非洲豬瘟病毒的特異性抗體。
化學(xué)發(fā)光免疫分析的原理：基于酶促化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，利用辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體與非洲豬瘟病毒抗原結(jié)合，加入化學(xué)發(fā)光底物后，通過(guò)檢測(cè)發(fā)光信號(hào)的強(qiáng)度來(lái)判斷病毒抗體的存在。
三、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)
SN/T1559-2024《非洲豬瘟檢疫技術(shù)規(guī)范》：本文件規(guī)定了非洲豬瘟病毒（ASFV）紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)、熒光抗體試驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、Taqman探針熒光PCR試驗(yàn)等技術(shù)要求，適用于家豬、野豬及其產(chǎn)品ASF的診斷和檢疫。
OIE標(biāo)準(zhǔn)：世界動(dòng)物衛(wèi)生組織規(guī)定了一系列非洲豬瘟檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)，包括熒光PCR檢測(cè)、ELISA檢測(cè)等。

閱讀剩余 50%